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三種文庫構建方法比較與推薦
質量: All-Direct方法>Invitrogen-Gateway方法>Clonetech SMART方法
便捷: All-Direct方法>Clonetech SMART方法>Invitrogen-Gateway方法
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突變文庫構建
分子定向進化是人為地模擬自然進化機制,利用現代分子生物學方法創造大量的突變同源基因文庫,采用靈敏的定向篩選策略,創造出自然界并不存在的或某些特性有顯著改變的突變蛋白質或其他生物分子。分子定向進化已廣泛應用于蛋白質的分子改造,被認為是生產具有改良或全新特性的蛋白質和調控序列的高效方法。
DNA文庫可以改變蛋白質的特定位點或者DNA的調控區域,可以用來研究結構和功能之間的關系。根據不同設計目的,體外合成的文庫可以更精確更隨意的控制所研究序列的多樣性。而且,合成的DNA文庫可以顯著提高獲得核酸或蛋白質突變體的效率和下游研究。
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突變文庫構建 分子定向進化是人為地模擬自然進化機制,利用現代分子生物學方法創造大量的突變同源基因文庫,采用靈敏的定向篩選策略,創造出自然界并不存在的或某些特性有顯著改變的突變蛋白質或其他生物分子。分子定向進化已廣泛應用于蛋白質的分子改造,被認為是生產具有改良或全新特性的蛋白質和調控序列的高效方法。 DNA文庫可以改變蛋白質的特定位點或者DNA的調控區域,可以用來研究結構和功能之間的關系。根據不同設計目的,體外合成的文庫可以更精確更隨意的控制所研究序列的多樣性。而且,合成的DNA文庫可以顯著提高獲得核酸或蛋白質突變體的效率和下游研究。寶吉生物可以合成客戶自己設計的各種DNA文庫,也可以根據需要幫助客戶設計合成所需的文庫。 請聯系我們咨詢文庫設計。 突變文庫構建服務特色 多種文庫類型,包括掃描文庫, 簡并文庫,三聯體文庫等 無差錯基因合成-保證100%序列正確 根據客戶需求合成文庫-您可以自己設計,也可以讓寶吉生物的專家團隊設計 文庫可以多種形式發貨,克隆,雙鏈DNA片段或者引物 DNA克隆根據客戶需求以載體或者其他形式發貨 序列100%驗證正確,文庫多樣性充分保證 合成DNA文庫的類型: 1)丙氨酸掃描文庫(Alanine Scan Library) 定點飽和突變文庫(Site Saturation Library) 2)簡并突變文庫(Degenerated Substitution Library) 3)氨基酸隨機突變文庫 應用領域: 研究工業酶的活性與結合位點關系 研究蛋白質的結構與功能的相互作用 提高蛋白質性質(活性增強、半衰期延長、穩定性增加) 交付結果: 10ug線性隨機PCR產物文庫(高達1011次方隨機突變克隆) 10ug隨機突變克隆文庫(高達109次方隨機突變克隆):亞克隆目標載體 隨機克隆測序報告(12個) 4)抗體文庫(Antibody Library) 5)模塊替換文庫(Modular Substitution Library) 合成DNA文庫交付標準 價格和交付時間
通過用丙氨酸逐一取代每一個位置或關鍵位置的氨基酸,發現對蛋白功能、相互作用和形態具有重要功能的氨基酸殘基。
任一位點包含所有20種氨基酸,用于檢測蛋白的一級結構與結構和功能之間的關系。
構建簡并堿基突變文庫對蛋白某一位點或某幾位點、甚至某些功能區域進行結構和功能分析。
通過我們獨特技術,實現可控、高精度的隨機化突變合成(A,T,C,G四種堿基在每個突變位點都更趨于均勻性)。隨機突變頻率可以精確控制在1-4個突變/kb,4-8個突變/kb,和8-12個突變/kb中任意一種形式。
合成多樣性高的抗體文庫,提高抗體特異性、免疫原性、親和性等。
拼接多種DNA元件(包括調控區或者編碼區)構建各種遺傳模塊/區域或者通路。單鏈引物文庫
Pooled ss Oligo Libraries雙鏈PCR產物文庫
Pooled ds PCR Libraries克隆文庫
Pooled Cloning Libraries測序驗證過的單克隆文庫
Error Free Separated Colonies Libraries長度 125nt左右 3kb左右 高達109個克隆 高達1百萬個裝在96孔板中的克隆 發貨形式 簡并引物或者三聯體堿基引物混合物 多樣性的PCR片段混合物 多樣性混合克隆文庫 測序驗證過的100% 正確的克隆 復雜度 可以包含高GC或低GC區,
連續重復,同聚體,回文結構30-70%GC含量,無重復序列 可以包含高GC或低GC區,
連續重復,同聚體,回文結構可以包含高GC或低GC區,
連續重復,同聚體,回文結構客戶載體 – – 可以將文庫克隆到客戶提供的載體上 可以將文庫克隆到客戶提供的載體上 質量保證 Sanger測序或NGS測序驗證多樣性 Sanger測序或NGS測序驗證多樣性 Sanger測序或NGS測序驗證多樣性 Sanger測序或NGS測序驗證多樣性 長度(nt/kb) 難度評估 多樣性測序分析 引物或者PCR片段量 質粒/菌液量 單克隆質粒量 單鏈引物文庫 雙鏈PCR產物文庫價格 混合克隆文庫價格 交付時間 0.02-0.125 √ √ 10 nmol – – Inquire – – 8-15工作日 0.125-3.0 √ √ 2μg 20-100μg/1-5ml 1-5μg – ¥1.5/bp+簡并/三聯體價格 ¥1.5/bp+簡并/三聯體價格 8-15工作日 1.5-3.0 √ √ 2μg 20-100μg/1-5ml 1-5μg – ¥2.0/bp+簡并/三聯體價格 ¥2.0/bp+簡并/三聯體價格 8-15工作日 3.0-6.0 √ √ – 20-100μg/1-5ml 1-5μg – – ¥2.5/bp+簡并/三聯體價格 20-40工作日 6.0-9.0 √ √ – 20-100μg/1-5ml 1-5μg – – ¥3.0/bp+簡并/三聯體價格 30-50工作日 >9.0 √ √ – 20-100μg/1-5ml 1-5μg – – ¥3.5/bp+簡并/三聯體價格 詢價
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